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                PCR實驗室建設

                作者: 點擊:1594 發布時間:2020-05-23

                PCR實驗室建設的四要素。

                1試劑準備區。

                用于備考試劑。該區域為正壓,目的是防止污染物溢出。該區域內部分為普通提取試劑的準備區域、PCR試劑的準備區域和PCR主反應液的準備區域。在普通提取試劑的準備區域內準備樣品核酸提取時所需的分解液、提取液等PCR試劑準備區域用于PCR試劑的制備和保存。例如準備引物、探針等PCR試劑。為了防止交叉污染,避免反復冷凍和解凍,試劑貯藏溶液應平均為小作業體積,貯藏在該房間后,PCR主反應液準備區進行主反應混合液(樣品除外)。將所有PCR所需試劑混合)添加到PCR管的操作中。重要提示:不得將其他房間的材料(包括擴張、模板和目標核酸或陽性對照、供應品或設備)帶入試劑準備區。

                2樣品準備區。

                該區域無壓力設置要求。該區域用于分樣,研磨、粉碎、均勻漿料。這些粉碎、研磨和均漿處理過程中可能會產生氣溶膠,因此陽性樣品可能會污染后續操作。該區與后區嚴格隔離,應放置在與后三區隔離的獨立房間內。在樣品準備區域內也可以設置專用的封閉區域和房間來接收和儲藏樣品。這個房間可以放冰箱儲藏樣品,應該和樣品準備區的其他區域隔離。樣品備用區的人員不得進入試劑備用區。

                3核酸提取區。

                核酸提取區是進行樣品核酸提取的區域。該區域為負壓,目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準備區域包括從樣品中提取核酸和純化的區域和將核酸添加到包括PCR主反應混合液管的操作區域。添加樣品后,PCR管蓋應盡快蓋上。使用PCR板和蓋板時,陽性對照和含有目標序列的樣品應與待測樣分開操作,以免模板添加時造成交叉污染。

                重要提示:該房間的所有物品都不得帶試劑準備區。

                4擴大和產品檢測區域。

                該區域用于擴大PCR和分析PCR。PER儀放在這個區域。房間保持負壓,目的是防止核酸溢出。在這個地區,人們必須一直穿工作服。

                手套和離開房間前脫離,防止擴張子污染其他地方。所有用于擴張和產品檢測的設備都應指定用于該房間。PCR分析]二作也設置在該區域,例如酶切割、序列、克隆等,但實驗室必須盡量將這些活動分隔到不同的區域和不同的房間。降低擴大產品的污染風險。如果沒有條件在該區域設置負壓,該區域必須設置排風裝置。

                重要提示:該房間的物品不得帶樣品準備區或試劑準備區。

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